SUMO 蛋白酶
产品说明:
SUMO 蛋白酶也称 Ulp,是一种具有较高活性的半胱氨酸蛋白酶,它能识别 SUMO 蛋白的三级结构,而不是氨基酸序列,因此可以高效而且特异性地将 SUMO 蛋白从重组融合蛋白上切割下来。SUMO 蛋白酶在较宽范围的反应环境体系中能保持较高的活性,如温度(4-30℃),PH (5.5-9.5)等,SUMO 蛋白酶带有多聚 His 标签,便于融合蛋白切割后利用亲和层析去除该蛋白酶。
保存条件:
SUMO 蛋白酶-80℃长期保存,可存储 2 年;首次使用后可置于-20℃保存,避免反复冻融。SUMO Protease Buffer 可置于-20℃保存。
酶活定义:
在 1× SUMO Protease Buffer (50 mM Tris-HCl, 1 mM DTT, pH 8.0) 中,30℃反应1h,剪切>85%的 2 μg 底物所需要的酶量定义为一个活性单位。
使用方法说明:
1. SUMO 蛋白酶与需要酶切的目的蛋白比例:1:100。
2. 酶切体系:
融合蛋白 1000 μg
SUMO Protease Buffer 20μL
SUMO 蛋白酶 2μL
ddH2O 定容至 1000μL
3. 酶切条件:
推荐 4℃酶切过夜,用户可以根据自己研究的目的蛋白进行摸索,以下酶切分析图片可供参考。
4. 酶切后可取少量样本进行 SDS-PAGE 分析,若要去除酶切后体系中的 SUMO 蛋白酶,可用 His 标签纯化树脂亲和层析。
注意事项:
1. 为达到最好的酶切效果,请保证重组蛋白为部分或完全纯化的蛋白。
http://www.solarbio.com 2. 对于大部分融合蛋白,SUMO 蛋白酶最理想的反应液中 NaCl 的浓度为 150mM。然而,
根据实际情况可在 100mM-300mM 之间调节 NaCl 的浓度以达到最佳的效果。实验中要考虑融
合蛋白中盐的浓度。
3. 咪唑的浓度应低于 150mM,若高于该浓度会影响 SUMO 蛋白酶的活性。